Miejsce pochodzenia: | Chiny |
Nazwa handlowa: | FOREGENE |
Orzecznictwo: | ISO CE |
Numer modelu: | RTL-09099 |
Minimalne zamówienie: | 1 zestawy |
---|---|
Cena: | Negotiable |
Szczegóły pakowania: | Pakowanie z bezpiecznym kartonem trans |
Czas dostawy: | 5-8 dni |
Zasady płatności: | L/C, D/P, T/T |
Możliwość Supply: | 100000 zestawów miesięcznie |
Nazwa produktu: | Lnc-RT HeroTM I (z gDNase) Super Premix do syntezy pierwszej nici cDNA z lncRNA Nr kat. RTL-09098/09 | Rodzaj: | Zestawy CDNA PCR |
---|---|---|---|
Pakiet: | 200 testów na zestawy | Funkcja: | Wydajny system odwrotnej transkrypcji |
Aplikacja: | Szybki i bardzo czuły system odwrotnej transkrypcji do generowania pierwszej nici cDNA z lncRNA | Stosowanie: | System odwrotnej transkrypcji opracowany specjalnie dla lncRNA do szybkiego usuwania zanieczyszczeń |
Oem: | Zaakceptować | Marka: | Foregene |
High Light: | Lnc-RT HeroTM I GDNaza,synteza CDNA Lnc RT Premiks |
Lnc-RT bohaterTMI (z gDNazą)
Super Premix do syntezy pierwszej nici cDNA z lncRNA
Nr kat.RTL-09098/09099
Opis:
Lnc-RT bohaterTMI (z gDNase) to system odwrotnej transkrypcji opracowany specjalnie dla lncRNA w celu szybkiego usuwania zanieczyszczeń genomowego DNA.5×gDNase Mix może szybko usunąć pozostały genom z RNA w 42°C przez 2 minuty, skutecznie unikając interferencji genomu z wynikami qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix zawiera Foregene LncRNA Reverse Transcriptase specjalnie opracowaną przez Foregene, która jest nowym typem odwrotnej transkryptazy specjalnie dla lncRNA i innych złożonych matryc RNA, o silniejszym powinowactwie RNA i wyższej wydajności zapisu odwrotnego.Zoptymalizowany system zwiększa szybkość odwrotnej transkrypcji i umożliwia łatwą transkrypcję szablonów RNA o wysokiej zawartości GC i złożonej strukturze drugorzędowej.Syntezę pierwszej nici cDNA można zakończyć w 42°C w 15 minut.
Dane techniczne:
25 × 20 μl Rxns, 50 × 20 μl Rxns
Elementy zestawu
Lnc-RT bohaterTMII (z gDNazą) Super Premix do syntezy pierwszej nici cDNA dla lncRNA z gDNazą |
||
Składnik zestawu | RTL-09098 | RTL-09099 |
25T (system 20 μl) | 50T (system 20 μl) | |
5× mieszanka gDNazy | 50 μl | 50 μl × 2 |
5× Bohater L-RTTMMieszać | 100 μl | 100 μl × 2 |
Bez RNaz ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml |
podręcznik | 1 | 1 |
Informacje o komponentach zestawów
-5×gDNase Mix: środek usuwający gDNA, przed przeprowadzeniem reakcji RT należy użyć odczynnika zgodnie z instrukcją obsługi (nie wolno zamrażać wewnętrznej zawartości glicerolu, jak również nie wolno jej zamrażać, co należy do normy zjawiska).
- 5×L-RT HEROTM MIX: Zawiera odwrotną transkryptazę Lncrna Foregene, inhibitor RNazy, DNTPS, Stabilifer, Enhancer, Optimizer, starter Oligo (DT) 18).
Funkcje i zalety:
-Wydajna zdolność usuwania gDNA, która może usunąć gDNA z matrycy w ciągu 2 minut.
-Potrafi skutecznie odwrócić transkrypcję lncRNA.Gdy produkt odwrotnej transkrypcji poddaje się qPCR, wartość Ct jest niższa niż w konwencjonalnym systemie odwrotnej transkrypcji.
-Wydajny system odwrotnej transkrypcji, ukończenie syntezy pierwszej nici cDNA zajmuje tylko 15 minut.
-Złożone szablony: szablony o wysokiej zawartości GC i złożonej strukturze drugorzędowej można również odwrócić z wysoką wydajnością.
-System odwrotnej transkrypcji o wysokiej czułości, szablony na poziomie pg mogą również uzyskać wysokiej jakości cDNA.
- System odwrotnej transkrypcji ma wysoką stabilność termiczną, optymalna temperatura reakcji wynosi 42 ℃ i nadal ma dobrą wydajność odwrotnej transkrypcji przy 50 ℃.
Wymagania dotyczące szablonu RNA
Najlepiej używać RNA wyekstrahowanego ze świeżych próbek lub zakonserwowanego w temperaturze -80 °C.
- Integralność szablonu: dobra integralność, brak degradacji.
- Czystość matrycy: jony, białka, EDTA, etanol, fenole i inne czasopisma zawarte w RNA wpłyną na aktywność odwrotnej transkryptazy i ostatecznie wpłyną na efekty odwrotnej transkrypcji.
Dawka wzorcowego RNA
- Dla lncRNA: 10ng-1 μg całkowitego RNA/20 μl systemu.
- Dla ogólnego RNA: 0,1 pg-1 μg całkowitego RNA lub 0,01 pg-0,1 μg mRNA/20 μl systemu.
Informacje o komponentach zestawów
- 5×gDNase Mix: środek usuwający gDNA, przed przeprowadzeniem reakcji RT należy użyć odczynnika zgodnie z instrukcją obsługi (nie wolno zamrażać wewnętrznej zawartości glicerolu, ani zamrażać, co należy do normy zjawiska).
- 5×L-RT BOHATERTMMIX: Zawiera odwrotną transkryptazę Lncrna Foregene, inhibitor RNazy, DNTPS, stabilizator, wzmacniacz, optymalizator, Oligo (DT) 18Elementarz).
Środki ostrożności: (Przeczytaj uważnie środki ostrożności przed użyciem zestawu)
- Szablon zaleca stosowanie świeżych próbek lub RNA konserwowanego w temperaturze -80 ° C (RNA powinno unikać wielokrotnego zamrażania-rozmrażania, zapewniając integralność RNA, brak degradacji).
- W celu uniknięcia zanieczyszczenia RNASE, operację eksperymentalną przeprowadza się w przestrzeni wolnej od RNaz;głowica pistoletu i wirówka PCR muszą być wolne od RNASE;i nosić jednorazowe rękawiczki i maski.
- Przed użyciem 5 × GDNase Mix i 5 × L-RT HEROTMMIX umieszcza się na lodzie, aby całkowicie się stopił, a lekki pocisk jest mieszany;system jest sformułowany, proszę działać na łaźni lodowej, aby poprawić działanie zestawu, poprawić działanie zestawu specyficzność amplifikacji PCR.
-5 × L-RT BOHATERTMMIX dodał starter odwrotnej transkrypcji o zoptymalizowanym stosunku bez dodawania jakichkolwiek starterów do dodatkowych dodatkowych starterów.
- W przypadku złożonej matrycy RNA o strukturze drugorzędowej temperaturę reakcji można zwiększyć do 50 ° C
Przepływ pracy:
Przechowywanie i okres trwałości:
TheZestawy Super Premix PCRnależy przechowywać w temperaturze -20°C.Natychmiast po otrzymaniu produkt przechowywać w lodówce o stałej temperaturze w temperaturze -20°C.Jeśli warunki przechowywania są odpowiednie, produkt nie pogorszy żadnej wydajności w okresie ważności 1 roku.
Przewodnik po analizie problemów
Poniżej znajduje się analiza problemów, które można napotkać podczas używania zestawów serii Lnc-RT HeroTM I (z gDNase), mając nadzieję, że okażą się pomocne w twoich eksperymentach.Ponadto zapewniamy dedykowane wsparcie techniczne, aby pomóc w przypadku innych problemów eksperymentalnych lub technicznych wykraczających poza instrukcje obsługi i pytania.Jeśli masz jakiekolwiek potrzeby, skontaktuj się z nami: 028-83361257 lub e-mail: Tech@foregene.com.
Nieswoista amplifikacja
1. Nierozsądny projekt podkładu
Zalecenie: Zaprojektuj podkłady zgodnie z zasadami projektowania podkładów.
2. Pozostałości genomu.
Sugestia: Upewnij się, że temperatura pierwszego etapu usuwania gDNA wynosi 42°C, a czas reakcji można również wydłużyć do 5 min.
Brak sygnału wzmocnienia przez RT-qPCR
1. RNA ulega degradacji.
Zalecenie: Materiał do ekstrakcji RNA powinien być tak świeży, jak to możliwe, a RNA o wysokiej jakości i czystości powinno być używane.
2. RNA zawiera inhibitory.
Zalecenie: Inhibitory odwrotnej transkrypcji zazwyczaj obejmują SDS, sole guanidyny, EDTA itp. Zaleca się przemycie precypitatu RNA 70% etanolem w celu usunięcia inhibitorów.
3. Zagadnienia projektowania podkładów.
Zalecenie: Zgodnie z zasadą projektowania podkładów przeprojektować podkłady do kontroli.
W pustej kontrolce pojawi się pasmo docelowe
1. Zanieczyszczenie narzędzi roboczych lub odczynników.
Zalecenie: Wszystkie odczynniki lub sprzęt do eksperymentu powinny być autoklawowane.Zachowaj ostrożność i delikatność podczas obsługi, aby zapobiec zassaniu próbek DNA do pipety lub wylaniu ich z probówki wirówkowej.
2. Zanieczyszczenie wystąpiło podczas przygotowywania układu reakcyjnego PCR.
Zalecenie: Podczas obsługi należy podjąć niezbędne środki ostrożności, takie jak: noszenie rękawiczek lateksowych, używanie końcówek z filtrem.Stosować Real Time PCR Mix w systemie odpornym na zanieczyszczenia.
3. Startery są zdegradowane.
Sugestia: Użyj elektroforezy SDS-PAGE, aby wykryć, czy startery uległy degradacji i zastąp nowymi starterami do eksperymentów z wykrywaniem fluorescencji.
Osoba kontaktowa: Maggie
Tel: +8615281067355