Odczynnik laboratoryjny Zestawy do bezpośredniej reakcji PCR na tkankę zwierzęcą Przeprowadzanie reakcji PCR bezpośrednio z tkanki zwierzęcej

Odczynnik laboratoryjny Zestawy Animal Tissue Direct PCR do przeprowadzania reakcji PCR bezpośrednio z tkanki zwierzęcej bez wcześniejszego oczyszczania DNA

Opis produktu

Zestaw Animal Tissue Direct PCR wykorzystuje unikalny system buforów do lizy do szybkiego uwalniania genomowego DNA z próbek tkanek zwierzęcych do reakcji PCR, dzięki czemu jest szczególnie odpowiedni do testów genetycznych na dużą skalę.

Proces uwalniania genomowego DNA z buforu do lizy kończy się w ciągu 10-30 minut w temperaturze 65°C, a uwolnione śladowe ilości DNA mogą być użyte jako matryca do reakcji PCR bez innych procesów, takich jak usuwanie białek i usuwanie RNA.

2×PCR łatwy^TMMieszanka ma silną odporność na inhibitory reakcji PCR i może wykorzystywać lizat badanej próbki jako matrycę do wydajnej i specyficznej amplifikacji.Ten odczynnik zawiera Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl₂, bufor reakcyjny, optymalizator PCR i stabilizator.Może być stosowany w połączeniu z buforem do lizy w celu szybkiego i łatwego wykrywania próbek i charakteryzuje się wysoką czułością, silną specyficznością i dobrą stabilnością.

Polimeraza DNA D-Taq jest polimerazą DNA opracowaną specjalnie przez firmę Foregene do bezpośrednich reakcji PCR.

Polimeraza DNA D-Taq ma silną tolerancję na różne inhibitory reakcji PCR i może skutecznie amplifikować śladowe ilości DNA w różnych złożonych układach reakcyjnych.Szybkość amplifikacji może osiągnąć 2Kb/min, co jest szczególnie odpowiednie dla bezpośredniej reakcji PCR.

Składniki produktu:

Funkcje i zalety:

- Nie ma potrzeby czasochłonnego i kosztownego oczyszczania DNA.

- Wymagana próbka jest niewielka, do eksperymentów można użyć zaledwie 5 mg tkanki zwierzęcej.

- Nie jest wymagana żadna specjalna obróbka, taka jak szlifowanie i kruszenie, a operacja jest prosta.

- Zoptymalizowany system PCR sprawia, że ​​PCR jest bardziej specyficzny i bardziej odporny na inhibitory reakcji PCR.

Aplikacja:

- Zakres zastosowania: różnorodne tkanki zwierzęce.

- DNA uwolnione z lizy próbki: stosować wyłącznie jako matrycę PCR.

- Zestaw może być używany do następujących celów: identyfikacja transgenów, genotypowanie zwierząt itp.

Kontrola jakości produktu:

Zgodnie z Total Quality Management System FOREGENE, każda partia zestawów do bezpośredniego PCR na zwierzętach jest wielokrotnie dokładnie testowana, aby zapewnić niezawodność i stabilność jakości każdej partii zestawów.

Informacje o składnikach zestawu

Bufor AL: Zapewnia środowisko wymagane do reakcji lizy tkanek zwierzęcych.

Foregene Protease: Liza tkanki zwierzęcej w obecności buforu do lizy w celu uwolnienia genomowego DNA.

2×PCR EasyTM Mix: Zawiera D-Taq DNA Polymerase specjalnie zmodyfikowaną przez Fuji Bio, dNTPs, MgCl2, bufor reakcji, wzmacniacz reakcji PCR, optymalizator i stabilizator itp. Do reakcji PCR wystarczy dodać odpowiednią mieszankę do lizy, startery i ddH2O do 2×PCR EasyTM Mix do reakcji PCR.

Bufor ładowania 6×DNA: Ten bufor ładowania nie zawiera SDS.W celu uzyskania dobrych wyników elektroforezy podczas elektroforezy w żelu agarozowym zaleca się stosowanie 6× DNA Loading Buffer dołączonego do zestawu.Nie używaj buforu ładującego zawierającego SDS, w przeciwnym razie podczas elektroforezy na ścieżce pojawi się duży ogon światła, co wpłynie na wyniki eksperymentu.

Warunki przechowywania

1. Warunki wysyłki

Cały proces jest transportowany w lodówce o niskiej temperaturze, aby zapewnić, że Część I i Część II zestawu są w stanie <4°C.

2. Warunki przechowywania

-Ten zestaw Część I jest przechowywany w temperaturze pokojowej lub 2-8 ℃.

-Reagent Buffer AL można przechowywać przez 12 miesięcy w suchych warunkach;w celu dłuższego przechowywania można go przechowywać w temperaturze 2–8°C.

Uwaga: W przypadku przechowywania w niskiej temperaturze roztwór jest podatny na wytrącanie.Przed użyciem należy umieścić roztwór w zestawie w temperaturze pokojowej, a jeśli to konieczne, podgrzać w łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez 10 minut w celu rozpuszczenia osadu i dobrze wymieszać przed użyciem.

-Reagent Foregene Protease ma unikalną formułę, aby zapewnić jego lepszą aktywność i stabilność, należy przechowywać go w temperaturze 4 ℃.

-Reagent 6×DNA Loading Buffer, może być przechowywany przez długi czas w temperaturze 4°C lub -20°C.

Ten zestaw Część II jest przechowywany w temperaturze -20°C.

-Odczynnik 2×PCR Łatwy^TMWymieszać, jeśli jest często używany, można go również przechowywać przez krótki czas w temperaturze 4°C (ograniczenie do wykorzystania w ciągu 10 dni).

Środki ostrożności:(Przed użyciem zestawu należy uważnie przeczytać środki ostrożności)

- Zwróć uwagę na czystość sprzętu laboratoryjnego i sposób obsługi eksperymentu, aby uniknąć zanieczyszczenia krzyżowego między próbkami.

- Do eksperymentów należy używać świeżo pobranych próbek tkanek zwierzęcych.Jeśli próbki tkanek są przechowywane przez długi czas, należy unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania próbek.

- Jeśli w buforze AL występuje osad, można go umieścić w temperaturze 37°C, aż osad zniknie, a roztwór wstrząsnąć przed użyciem.

- Foregene Protease ma unikalną formułę, przechowuj w temperaturze 4 ℃, nigdy -20 ℃.

-2×PCR łatwy^TMMieszanka powinna unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania, w przeciwnym razie wpłynie to na wydajność PCR.

- Jeśli temperatura otoczenia jest zbyt wysoka, 2×PCR EasyTM Mix może stać się mętny.Można go umieścić na lodzie na 1-2 minuty.Gdy roztwór będzie przezroczysty, odwróć go w górę iw dół 3-5 razy przed użyciem.

- Nie używaj buforu ładującego zawierającego SDS podczas wykrywania elektroforezy, w przeciwnym razie podczas elektroforezy pojawi się duża grupa ciągnących się jasnych prążków na torze pływania, co wpłynie na wyniki eksperymentu.

Reakcja kontrolna PCR

W analizie wyników PCR, zarówno pozytywnych, jak i negatywnych, bez reakcji kontrolnej nie możemy być pewni, że wyniki są wiarygodne.Aby ułatwić analizę kolejnych wyników eksperymentalnych, zalecamy ustawienie pozytywnych i negatywnych reakcji kontrolnych PCR podczas PCR w celu wykluczenia interferencji wyników fałszywie dodatnich lub fałszywie ujemnych.

Odp.: kontrola pozytywna

Użyj starterów konserwowanych genów w próbce, które są łatwe do amplifikacji i użyj oczyszczonego DNA próbki jako matrycy do przeprowadzenia reakcji kontroli pozytywnej w celu określenia poprawności systemu i warunków reakcji PCR oraz skuteczności 2×PCR Easy_TMMieszać.Przygotowanie układu reakcyjnego pokazano w Tabeli 3 poniżej.

Tabela 3:Przygotowanie systemu kontroli reakcji PCR

1*: Można wybrać startery konserwatywnych genów, które są łatwiejsze do amplifikacji w tej próbce, takie jak gen β-aktyny, konserwatywne sekwencje w genomie itp. (proszę zapewnić dostępność tych starterów).

2*: DNA oczyszczony z próbki może być selekcjonowany lub może być selekcjonowany zgodnie z potrzebami doświadczalnymi.