Tel:
Foregene Co., Ltd.
Foregene Co., Ltd.

Foregene Co., Ltd.

OBJAZDEK CHIŃSKI, OBJAZDEK ŚWIATA!

Dom ProduktyZestawy do PCR

Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy

Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy

  • Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy
  • Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy
  • Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy
Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy
Szczegóły Produktu:
Miejsce pochodzenia: CHINY
Nazwa handlowa: FOREGENE
Orzecznictwo: ISO CE
Numer modelu: RT-02021
Zapłata:
Minimalne zamówienie: 1 zestawy
Cena: 224 usd per kit
Szczegóły pakowania: Pakowanie z bezpiecznym kartonem trans
Czas dostawy: 10 dni roboczych
Zasady płatności: L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union
Możliwość Supply: 10000 zestawów miesięcznie
Kontakt
Szczegółowy opis produktu
Nazwa: RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy) do reakcji PCR Aplikacja: Do reakcji PCR
Uszczelka: 100 RXns na zestaw MOQ: 1 zestawy
Wiodący czas: 10 dni roboczych Marka: Foregene
OEM: Przyjęty Zapłata: TT
czas przechowywania: 2 lata
High Light:

OEM RT-PCR EasyTM II

,

dwuetapowy Master Mix RT-PCR

,

zestaw RT i PCR Reaction Kit

Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy) do reakcji PCR

RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy)

Nr kat.RT-02021/02022

Dwuetapowy miks RT-PCR Master Mix

Wyłącznie do celów badawczych

Przechowywać w temperaturze -20 ℃

 

 

Wprowadzenie produktów

RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy) zawiera wszystkie odczynniki do dwuetapowego RT-PCR, łącząc reakcję RT i reakcję PCR w tym samym zestawie, zapewniając zoptymalizowane RT Mix i PCR Mix.Unikalny RT Mix może łatwo i wydajnie syntetyzować wysokiej jakości pierwszej nici cDNA.2× PCR EasyTM Mix Plus charakteryzuje się wysoką wydajnością i specyficzną amplifikacją.Organiczne połączenie tych dwóch sprawia, że ​​wykrywanie genu docelowego jest bardziej czułe.

Cechy

Analizę ilościową RNA w czasie rzeczywistym można przeprowadzić szybko i dokładnie.

Zestaw wykorzystuje unikalny odczynnik Foregene do odwrotnej transkrypcji oraz polimerazę Foregene HotStar Taq DNA w połączeniu z unikalnym systemem reakcji, aby skutecznie poprawić wydajność amplifikacji i specyficzność reakcji.

Zoptymalizowany system reakcji sprawia, że ​​reakcja ma wyższą czułość wykrywania, silniejszą stabilność termiczną i lepszą tolerancję.

Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy 0

Zawartość zestawu

RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy)
Zawartość zestawu RT-02021 RT-02022
100T (system 20 μl) 500T (system 20 μl)
2× RT EasyTM Mix 1ml 1,7 ml × 3
2× PCR EasyTM Mix Plus 1ml 1,7 ml × 3
Losowy podkład (50 μM) 200 μl 1ml
Podkład Oligo(dT)18 (50 μM) 200 μl 1ml
ddH2O . bez RNaz 1,7ml 1,7ml
Instrukcja obsługi 1 kawałek 1 kawałek

 

Warunki transportu i przechowywania

1. Warunki transportu

Cały proces transportu lodówek w niskich temperaturach, aby zapewnić, że zestaw jest w stanie <4 °C.

2. Warunki przechowywania

Przechowywany w temperaturze -20°C.Natychmiast po otrzymaniu produkt przechowywać w lodówce o stałej temperaturze w temperaturze -20°C.Jeśli warunki przechowywania są odpowiednie, produkt nie pogorszy właściwości użytkowych w okresie ważności 1 roku.

Informacje o elementach zestawu

2× RT EasyTM Mix: Foregene Reverse Transcriptase, inhibitor RNazy, dNTPs, bufor reakcyjny, optymalizator i stabilizator itp.

2× PCR EasyTM Mix Plus :Foregene Taq DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+, bufor reakcyjny, optymalizator i stabilizator.

Środki ostrożności: (Przeczytaj uważnie środki ostrożności przed użyciem zestawu)

Odczynniki powinny unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania, w przeciwnym razie działanie odczynników zmniejszy się lub stanie się nieważne.

W przypadku matryc zaleca się stosowanie RNA wyekstrahowanego ze świeżych próbek lub przechowywanego w temperaturze -80℃ (RNA powinno unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania).

Aby uniknąć zanieczyszczenia RNazami, działanie eksperymentu należy przeprowadzić w przestrzeni wolnej od RNaz;używane końcówki do pipet i probówki wirówkowe do PCR muszą być wolne od RNaz;należy nosić jednorazowe rękawiczki i maski.

Ten zestaw musi być używany z określonymi starterami do eksperymentów.Proszę wybrać specyficzne startery dla genu do amplifikacji zgodnie z potrzebami eksperymentu.

Przed użyciem umieść 2×RT EasyTM Mix i 2×PCR EasyTM Mix Plus na lodzie, aby całkowicie się roztopiły, strzepnęły i dobrze wymieszały przed użyciem;przygotowanie systemu powinno odbywać się w łaźni lodowej, aby poprawić działanie zestawu i poprawić specyficzność amplifikacji PCR.

Stężenie wzorcowego RNA

RT-PCR EasyTM II (dwuetapowy): (całkowite RNA 0,1 pg-5 μg)/system 20 μl

Przewodnik po operacjach

A-1: Przygotowanie materiałów i odczynników

1. Przygotuj przygotowaną matrycę RNA (zaleca się użycie zestawów serii Foregene Total RNA Isolation Kit do ekstrakcji i oczyszczania RNA), specyficzne startery (10 μM) oraz powiązane materiały eksploatacyjne i instrumenty.

Uwaga: Upewnij się, że RNA jest integralne i spróbuj użyć RNA wyekstrahowanego ze świeżych próbek.

2. Umieść 2×RT EasyTM Mix i ddH2O bez RNaz na łaźni lodowej, aby naturalnie się rozpuścił, a następnie przetrzyj ścianką probówki, aby dobrze wymieszać do późniejszego użycia.

A-2:Przygotowanie systemu RT

2× RT EasyTM Mix jest wygodny i szybki w użyciu, w największym stopniu unikając zanieczyszczeń podczas pracy i błędów doświadczalnych spowodowanych wielokrotnym przygotowywaniem układu reakcyjnego.Podczas używania wystarczy pobrać połowę objętości układu reakcyjnego (na przykład, jeśli układ reakcyjny ma 20 μl, weź 10 μl roztworu 2×RT EasyTM Mix), dodać matrycę RNA i startery odwrotnej transkrypcji oraz dodać ddH2O bez RNaz, aby uzupełnić objętość do 20 μl.Konkretny sposób przygotowania układu reakcyjnego RT można znaleźć w Tabeli 1 poniżej.

Formularz 1: Przygotowanie systemu RT

Dodatki do systemu RT-PCR Kwota
2× RT EasyTM Mix 10 μl
Losowy podkład (50 μM) 1 μl
lub podkład Oligo(dT)18 (50μM) 1 μl
lub specyficzny podkład (2 μM) 1 μl
Szablon (RNA)

Xμl

(Całkowite RNA:<5μg / mRNA:<0,5μg)

Wolna od RNazddH2O (9-X) μl
Maksymalna głośność 20 μl
 

A-3: ustawienie programu reakcji RT

1. Po przygotowaniu systemu RT zgodnie z powyższą tabelą należy delikatnie wymieszać (można użyć końcówki pipety do delikatnego przedmuchu; można również wymieszać na worteksie i odwirować w celu zebrania płynu rozsypanego na ściance probówki lub korku probówki i umieść go w gotowym do użycia pojemniku na lód).

2. Zapoznaj się z ustawieniami programu reakcji RT (Tabela 2), aby ustawić temperaturę reakcji, czas itp.

Uwaga: Aby zapewnić aktywność Mixa i poprawić jego skuteczność amplifikacji, najlepiej przygotować układ reakcyjny RT po osiągnięciu przez kąpiel metalową zadanej temperatury reakcji (temperatura odwróconej transkrypcji 42℃ lub 50℃), aby układ mógł być przygotowany natychmiast po zakończeniu przygotowania systemu.Wejdź do programu reakcji.Reakcję RT można również przeprowadzić na maszynie do PCR.

Formularz 2: Ustawienie programu reakcji RT

Krok Temperatura Czas Zawartość
1 42 ℃ lub 50 ℃ 20 minut Renaturacja i RT
2 85℃ 5 minut Dezaktywacja

Uwaga: W przypadku użycia startera Random, reakcję należy wstępnie ogrzać w temperaturze 25°C przez 10 minut przed pierwszym etapem reakcji.Powyższa procedura ma jedynie charakter poglądowy.Rzeczywiste warunki reakcji różnią się w zależności od warunków strukturalnych matrycy, starterów itp. W przypadku matryc RNA ze złożonymi wynikami wtórnymi zaleca się, aby temperatura pierwszej reakcji wynosiła 50°C.

1. Produkt reakcji można wykorzystać bezpośrednio w kolejnych testach lub przechowywać w temperaturze -20°C do tygodnia.W przypadku przechowywania długoterminowego zaleca się unikanie wielokrotnego zamrażania i rozmrażania w temperaturze -80°C.

 

B: reakcja identyfikacji PCR

B-1: Przygotowanie układu reakcji PCR

Użyj cDNA zsyntetyzowanego w etapie A jako matrycy i przeprowadź reakcję PCR za pomocą zestawu 2×PCR EasyTM Mix Plus dostarczonego w zestawie.Umieść 2×PCR EasyTM Mix Plus, cDNA i ddH2O bez RNaz na łaźni lodowej, aby naturalnie się stopiły, a następnie przetrzyj ścianką probówki, aby wymieszać aż do użycia.W celu zapoznania się z konkretnym przygotowaniem systemu PCR, należy zapoznać się z Tabelą 3 poniżej.

Formularz 3: Przygotowanie układu reakcji PCR反应体系配制

Dodatki do systemu RT-PCR Kwota Stężenie końcowe
2× PCR EasyTM Mix Plus 10 μl
Podkład do przodu (10 μM) 0,5 μl 0,2-0,25 μM 1*
Odwrócony podkład (10 μM) 0,5 μl 0,2-0,25 μM 1*
Szablon (cDNA) Xμl 1-2 μl
Wolna od RNazddH2O (9-X) μl  
Maksymalna głośność 20 μl  
 

1*: Zwykle końcowe stężenie podkładu wynosi 0,2-0,25 μM, aby uzyskać lepsze wyniki.Gdy wydajność reakcji jest słaba, stężenie podkładu można regulować w zakresie 0,1-0,5 μM.

 

B-2: ustawienie warunków reakcji PCR

1. Po przygotowaniu systemu PCR zgodnie z powyższą tabelą należy delikatnie wymieszać (można użyć końcówki pipety do delikatnego przedmuchu; można również wymieszać na worteksie i odwirować w celu zebrania płynu rozsypanego na ściance probówki lub korku probówki i umieść go w gotowym do użycia pojemniku na lód).

2. Zapoznaj się z ustawieniami programu reakcji PCR (Tabela 4), aby ustawić temperaturę i czas reakcji.

Uwaga: Aby zapewnić aktywność mieszaniny PCR Mix i poprawić jej wydajność amplifikacji, najlepiej ustawić warunki PCR w urządzeniu do PCR przed przygotowaniem systemu do PCR.

Formularz 4: Ustawienie warunków reakcji PCR

Krok Temperatura Czas Cykle Zawartość
1 94℃ 5 minut 1 Predenaturacja
2 94℃ 10sek 30-40 Denaturacja
3 55-65 ℃ 20sek Wyżarzanie
4 72℃ Xmin (2kb/min) 1* Rozbudowa
5 72℃ 5 minut 1 Ostateczne rozszerzenie

1*: Ustaw konkretny czas zgodnie z długością amplifikowanego fragmentu docelowego.Szybkość amplifikacji polimerazy Foregene Taq DNA wynosi 2 kb/min.

Uwaga: Warunki reakcji PCR różnią się w zależności od warunków strukturalnych matrycy, starterów itp. W przypadku matryc RNA o złożonych strukturach drugorzędowych zaleca się, aby temperatura reakcji dla pierwszego etapu odwrotnej transkrypcji wynosiła 50°C.W określonych operacjach konieczne jest zaprojektowanie optymalnych warunków reakcji, w tym temperatury hybrydyzacji, czasu wydłużania itp., zgodnie z określonymi warunkami, takimi jak wielkość docelowego fragmentu, sekwencja zasad amplifikowanego fragmentu oraz zawartość GC i długość podkładu.


Schemat działania RT-PCR

Reakcja RT i reakcja PCR w tym samym zestawie RT-PCR EasyTM II Dwuetapowy 1

Szczegóły kontaktu
Foregene Co., Ltd.

Osoba kontaktowa: David

Tel: +8616602829025

Wyślij zapytanie bezpośrednio do nas
Inne produkty
Foregene Co., Ltd.
Budynek D2, blok A, centrum innowacji Tri-medical, nr 18, North Bayi Road, miasto Yongning, dystrykt Wenjiang, miasto Chengdu, prowincja Syczuan, Chiny
Tel:86-028-86050301
Strona mobilna Polityka prywatności | Chiny dobry jakość Zestawy do PCR dostawca. © 2022 - 2023 foregenebio.com. All Rights Reserved.