Plant Seed Direct PCR Kit I-UNG Do nasion roślin zawierających składniki o niskiej zawartości polisacharydów i polifenoli

Opis:

Zestaw do bezpośredniego PCR z nasion roślin I-UNGwykorzystuje unikalny system reakcji lizy, który może szybko uwolnić genomowy DNA z próbek nasion roślin o niskiej zawartości polisacharydów i polifenoli (takich jak: ryż, pszenica, tytoń, kukurydza, soja itp.) do wykorzystania w reakcjach PCR, dlatego jest szczególnie odpowiednie testy genetyczne na dużą skalę.W celu zaspokojenia potrzeb różnych testów wykrywania, zestaw ten może wykorzystywać do eksperymentów wiele rodzajów próbek (takich jak całe nasiona, małe kawałki tkanki lub zmielone próbki wielu nasion).Wśród nich, w przypadku próbek nasion, które nadal wymagają kiełkowania, można wybrać do eksperymentu wycięcie mikrotkanek (1-5 mg) innych niż zarodek nasion;w przypadku eksperymentów, które wymagają pobrania dużej liczby próbek, można wybrać mieszanie wielu próbek i łączenie ich.Po zmieleniu na cząstki o średnicy około 0,5 mm można przeprowadzić eksperyment (można wykryć co najmniej 0,1% próbki docelowej).

Proces uwalniania genomowego DNA z układu reakcji cięcia może zakończyć się w ciągu 5-10 minut.Nie ma potrzeby przeprowadzania innych procesów w celu usunięcia białka, RNA lub wtórnych metabolitów, a uwolnione śladowe ilości DNA można wykorzystać jako matrycę do reakcji PCR.

2× Łatwy PCR nasion^TMMieszanka ma silną tolerancję na inhibitory reakcji PCR i może bezpośrednio wykorzystywać lizowaną mieszaninę materiałów roślinnych jako matrycę do wydajnej i specyficznej amplifikacji.Ten odczynnik zawiera firmową polimerazę DNA D-Taq, dNTP, MgCl2, bufor reakcji, wzmacniacz reakcji PCR, optymalizator i stabilizator specjalnie zmodyfikowane do bezpośredniego PCR.Stosowany w połączeniu z systemem reakcji lizy umożliwia szybkie i łatwe wykrywanie próbek i charakteryzuje się wysoką czułością, silną specyficznością i dobrą stabilnością.

2× Łatwy PCR nasion^TMMix (UNG) wykorzystuje dUTP zamiast dTTP na podstawie 2× Seed PCR EasyTM Mix i dodaje enzym UNG (Uracil-N-glikozylaza), który może jednocześnie degradować matrycę zawierającą dUTP.Przed reakcją PCR do degradacji produktu PCR zawierającego uracyl stosuje się enzym UNG.Enzym UNG nie będzie miał żadnego wpływu na matrycę niezawierającą uracylu, zapewniając w ten sposób specyficzność i dokładność amplifikacji oraz zapobiegając możliwości badań genetycznych na dużą skalę.Wystąpiło zanieczyszczenie produktów PCR

Polimeraza DNA D-Taq to polimeraza DNA opracowana specjalnie przez firmę Foregene do bezpośrednich reakcji PCR.Polimeraza DNA D-Taq ma silną tolerancję na różne inhibitory reakcji PCR i może skutecznie amplifikować śladowe ilości DNA w różnych złożonych systemach reakcyjnych, a prędkość amplifikacji może osiągnąć 2 Kb/min, co jest szczególnie odpowiednie dla bezpośredniej reakcji PCR.

Ze względu na różnice w próbkach roślinnych produkty podzielono na dwie kategorie: Plant Seed Direct PCR Kit i Plant Seed Direct PCR Plus Kit.Na etapie lizy, biorąc pod uwagę, że różne rodzaje nasion lub materiałów tkankowych różnią się znacznie pod względem ilości odczynników stosowanych w procesie lizy, klienci mogą wybrać odpowiedni zestaw nasion roślin (małych i średnich) do bezpośredniego PCR lub nasion roślin (dużych) zgodnie z wielkość ich materiałów doświadczalnych Zestaw do bezpośredniego PCR;na etapie wykrywania PCR klienci mogą również wybrać zwykły 2× Seed PCR EasyTM Mix lub 2× Seed PCR Easy^TMMieszanka (UNG), która może zapobiec zanieczyszczeniu produktów amplifikacji PCR zgodnie z potrzebami doświadczalnymi.

Dane techniczne:

50 × 20 µl RXns, 200 × 20 µl RXns, 500 × 20 µl RXns, 2000 × 20 µl RXns

Elementy zestawu:

Funkcje i zalety:

- Nie jest wymagane czasochłonne i kosztowne oczyszczanie DNA.

- Zapotrzebowanie na próbki jest małe, wystarczy wziąć pojedyncze nasiono.

- Nie są wymagane żadne specjalne zabiegi, takie jak szlifowanie i kruszenie, a operacja jest prosta.

- Zoptymalizowany system PCR umożliwia PCR wyższą specyficzność i silniejszą tolerancję na inhibitory reakcji PCR.

- System Anti-pollution PCR 2× Seed PCR EasyTM Mix (UNG) może skutecznie wyeliminować zanieczyszczenia powodowane przez produkty PCR i zapewnić specyficzność i dokładność amplifikacji.

Parametry zestawu:

Zastosowanie: identyfikacja roślin transgenicznych, genotypowanie itp.

Próbka: Nasiona lub tkanki roślinne o niskiej zawartości polisacharydów i polifenoli.

Wielkość próbki: Pojedyncze całe ziarno, 1-100mg tkanki roślinnej

Zakres wykrywania: produkt PCR ≤1kb

Aplikacja

- Zakres zastosowania: różnorodne nasiona roślin.

- DNA uwolnione z lizy próbki: stosowane wyłącznie jako matryca PCR.

- Zestaw może być używany do następujących celów: identyfikacja nasion transgenicznych, genotypowanie roślin itp.

Informacje o składzie zestawu

- Bufor SP1: Zapewnia środowisko wymagane do reakcji lizy nasion roślin.

- Bufor SP2: Zneutralizuj lizat, aby nie wpływał na dalszą reakcję PCR.

-2× Łatwy PCR nasion^TMMix (UNG): Zawiera specjalnie zmodyfikowaną polimerazę Taq DNA, enzym UNG, dNTPs, dUTP, MgCl2, bufor reakcji, wzmacniacz reakcji PCR, optymalizator i stabilizator itp. Podczas reakcji PCR wystarczy dodać odpowiednią mieszaninę do lizy, startery i ddH2O do 2× Seed PCR EasyTM Mix (UNG), który ma być użyty do reakcji PCR.

-6× Bufor ładujący DNA: Bufor ładujący nie zawiera SDS.W celu uzyskania dobrych wyników elektroforezy zaleca się stosowanie 6× DNA Loading Buffer dołączonego do zestawu podczas elektroforezy w żelu agarozowym.Nie używaj buforu ładowania zawierającego SDS, w przeciwnym razie podczas elektroforezy na linii pojawi się duży ogon jasnego światła, co wpłynie na wyniki eksperymentu.

Przepływ pracy:

Elektroforogram:

Przechowywanie i okres trwałości:

-Część I tego zestawu powinna być przechowywana w temperaturze pokojowej lub 2-8 ℃.

vReagents Buffer SP1, Buffer SP2, 6× DNA Loading Buffer, w suchych warunkach, może być przechowywany przez 12 miesięcy.Jeśli potrzebujesz przechowywać zestaw przez dłuższy czas, możesz go przechowywać w temperaturze 2-8 ℃.

-Część II tego zestawu powinna być przechowywana w temperaturze -20 ℃.

vReagent 2× Seed PCR Easy Mix, jeśli jest często używany, może być również przechowywany w temperaturze 4 ℃ do krótkotrwałego przechowywania (zużycie w ciągu 10 dni).

DODATEK I

Porównanie Direct PCR i tradycyjnego PCR: